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| 1 | 一株地衣芽胞杆菌产碱性蛋白酶条件优化显示文摘【背景】碱性蛋白酶是众多芽胞杆菌的发酵产物,是工业上极其重要的一类酶。【目的】利用酪素培养基从环境样品中筛选出一株产碱性蛋白酶的菌株,对传代次数、发酵的碳源、氮源、金属离子、磷酸盐、初始pH、接种量和温度进行优化,提高其产碱性蛋白酶的能力并降低发酵成本。【方法】采用革兰氏染色法、扫描电镜、生理生化试验、16S rRNA基因序列对分离的菌株进行鉴定;采用单因素、Plackett-Burman、最陡爬坡和响应面试验优化碱性蛋白酶的发酵条件,使用Minitab对试验数据进行分析。【结果】经鉴定分离菌株为地衣芽胞杆菌,命名为Bacillus licheniformis NWMCC0046。优化后的发酵培养基组成为(g/L):豆粕50.00,葡萄糖10.00,酵母浸膏13.46,CaCl_(2)0.50,Na_(2)HPO_(4)·12H_(2)O 4.00,KH_(2)PO_(4)0.30;优化后的培养条件为:pH 7.5,34.81℃,接种量4.13%。在此条件下,摇瓶发酵48 h时碱性蛋白酶活性达到165.41 U/mL,较优化前提高了8.04倍。【结论】通过发酵培养基组成和条件优化有效提高了地衣芽胞杆菌产碱性蛋白酶的能力,为碱性蛋白酶的后续研究提供了参考。 | 周魏 曾嵩玉 余金凤 向军 马忠仁 丁功涛 周雪雁 张福梅 | 2022 | 微生物学通报2022，49，7： | 4 |
| 2 | 新疆传统乳制品中产蛋白酶乳酸菌的筛选及产酶条件优化显示文摘以新疆传统发酵乳制品为分离源,分离筛选产蛋白酶的乳酸菌,并通过形态学观察及16S rDNA序列比对鉴定菌株。以碳源、氮源、金属盐、磷酸盐的种类和添加量为影响因素,以蛋白酶活作为评价指标,通过单因素试验和正交试验优化乳酸菌产蛋白酶的产酶条件。结果表明,从样品中分离筛选出乳酸菌16株,产蛋白酶的乳酸菌4株(编号为A1~A4),分别被鉴定为戊糖片球菌(Peciococcus pentosaceus)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、短乳杆菌(Lactobacillxus brevis)、乳酸明串珠菌(Leuconostoc lactis)。在以4.0%葡萄糖为碳源、4.0%牛肉膏为氮源、0.02%的镁离子为金属盐、0.7%的K_(2)HPO_(4)为磷酸盐的条件下,菌株A2产蛋白酶活最高为65.92 U/mL。 | 张伟 金庭飞 黎旭 张凯莉 | 2021 | 中国酿造2021，40，7： | 3 |
| 3 | 高产淀粉酶菌株Bacillus subtilis XC2的产酶条件及酶学性质显示文摘试验研究从高产淀粉酶菌株Bacillus subtilis XC2的产酶条件及酶学性质。通过单因素试验和正交试验,初步探究淀粉酶酶学性质并优化菌株发酵产酶条件。结果表明,菌株XC2产淀粉酶的反应最适温度为50℃,最适反应pH值为6.0,在30~50℃和pH值4.0~7.0时酶活稳定性较好,Fe^(2+)、Cu^(2+)和Zn^(2+)对酶活有促进作用,Na^(+)对酶活有抑制作用。菌株XC2产淀粉酶最佳条件为蔗糖添加量1.5%、牛肉膏添加量2.0%、K^(+)添加量0.6%、培养温度37℃、转速200 r/min、初始pH值7.0、发酵时间21 h。研究表明,对产酶条件优化后,Bacillus subtilis XC2产淀粉酶活力达984.5 U/mL。 | 曹慧 张腾月 杨佳萌 张会会 苏奎源 刘真 刘紫祎 张镯 | 2021 | 饲料研究2021，44，17： | 3 |
| 4 | 高产蛋白酶菌的筛选及其对螺旋藻发酵物活性的影响研究显示文摘为了更好地利用微生物发酵方法制备螺旋藻生物活性肽,从螺旋藻泥天然发酵液中筛选高产蛋白酶的菌株,并对其发酵产物进行了功能评价。形态观察和16S rRNA菌种鉴定结果显示,3株蛋白酶高产菌株分别为解淀粉芽孢杆菌、芽孢杆菌和短小芽胞杆菌。以3株菌及其混菌发酵螺旋藻,对所得发酵产物的3种活性成分(多肽、总黄酮和总酚)、4种抗氧化指标(DPPH自由基清除率、ABTS阳离子自由基清除率、铁离子还原力、总抗氧化能力)和血管紧张素I转移酶(angiotensin I converting enzyme,ACE)抑制活性进行了测定。结果表明单菌发酵和混菌发酵的产物中活性成分的含量及其抗氧化活性和ACE抑制活性均显著提高,以混菌发酵提高最为明显,效果最为优异,混菌发酵液中3种成分的含量分别提高305.2%、267.8%和164.2%;4种抗氧化活性指标分别提高611.5%、189.8%、354.4%、316.0%,ACE抑制活性提高102.6%。筛选获得的菌株在制备螺旋藻生物活性肽方面具有较好的应用价值和广阔的市场前景。 | 刘云鹏 尤升波 马德源 夏晗 边斐 耿耘 石士涛 于金慧 毕玉平 | 2021 | 食品与发酵工业2021，47，13： | 2 |
| 5 | 酶催化在维生素及其衍生物制备中的应用显示文摘酶是一种天然的催化剂,与化学催化剂相比,酶往往具有独特而卓越的催化性能。对酶的挖掘、改造和应用一直是生物工程重要研究方向。随着酶的挖掘和改造技术不断发展进步,酶催化技术在工业上的应用范围也越来越广。在维生素工业生产中,维生素C和维生素B_(12)早已实现发酵法生产,而维生素B_(2)在21世纪初也由化学合成转向发酵法生产。除上述维生素外,其他维生素均主要采用化学路线合成。而在维生素的化学合成路径中,酶催化替代化学催化的案例越来越多,比如维生素B_(3)、维生素B_(5)和维生素D_(3)的合成,以及维生素酯类和糖苷类衍生物的合成。所涉及的酶种类包括酯水解酶、天冬氨酸酶、P450酶和脂肪酶等。本文对酶的筛选和改造方法做了总结,综述了酶催化技术在维生素及其衍生物合成中的应用。随着对酶催化机制的深入理解,化学工程、计算机辅助设计等多学科交叉融合,酶催化技术将在维生素及其他天然产物的合成方面发挥其独特优势。 | 王盼盼 于洪巍 | 2022 | 合成生物学2022，3，3： | 2 |
| 6 | 西农萨能奶山羊瘤胃产蛋白酶酵母菌的筛选研究显示文摘试验旨在从西农萨能奶山羊瘤胃液中分离出产蛋白酶的酵母菌株,并对其产酶能力进行测定。以蛋白酶的活性进行筛选,得到高产蛋白酶酵母菌,对其产酶条件进行优化。经形态学观察及26S rDNA序列分析鉴定出5株产蛋白酶酵母菌,分别对各菌株产酶条件进行优化,在最佳产酶条件下,菌株库德毕赤酵母Y1(时间48 h、接菌量3%、温度30℃、pH值9)产酶活力达229.89 U/mL,东方伊萨酵母Y5(时间48 h、接菌量4%、温度37℃、pH值9)产酶活力达212.63 U/mL,马克斯克鲁维酵母Y16(时间48 h、接菌量3%、温度37℃、pH值9)产酶活力达208.44 U/mL,近平滑假丝酵母Y20(时间48 h、接菌量4%、温度37℃、pH值9)产酶活力达211.74 U/mL,单孢酿酒酵母Y21(时间48 h、接菌量4%、温度30℃、pH值9)产酶活力达209.96 U/mL。同时对五株酵母菌产水解酶的效果进行了探究,发现库德毕赤酵母Y1、马克斯克鲁维酵母Y16、单孢酿酒酵母Y21具有较高的植酸酶活性,达到14.38、15.34、15.63 U/mL;五株菌株均表现出较高的果胶酶活性,其中单孢酿酒酵母Y21显著高于其他菌株(P<0.05),达到15.18 U/mL;五株菌株均表现出较高的纤维素酶活性,均超过180 U/mL,其中近平滑假丝酵母Y20显著高于其他菌株(P<0.05),达到199.08 U/mL。试验成功分离出5株产蛋白酶菌。库德毕赤酵母Y1、马克斯克鲁维酵母Y16、单孢酿酒酵母Y21具有较高的植酸酶活性。五株菌株均表现出较高的果胶酶活性、纤维素酶活性。 | 魏满红 张佳运 陈玉林 杨雨鑫 | 2021 | 饲料工业2021，42，5： | 1 |
| 7 | 一株枯草芽孢杆菌的水解酶特性及其对盐胁迫的响应显示文摘为筛选用于分解高盐有机废水有机碳的微生物资源,本研究采用稀释涂布法和脱色圈平板试验法,从竹笋加工废弃物中分离筛选得到1株耐盐产酶细菌,通过形态学、扫描电镜观察、生理生化特征、16S rRNA基因序列分析鉴定菌株。采用单因素控制法优化菌株生长条件,并测定了盐胁迫下菌株的生长及蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶等水解酶的酶活力。结果表明:(1)得到1株耐盐性能好且有机碳分解能力强的枯草芽孢杆菌(Bacillus stubilis)ACP81。它能够在浓度为1%~19%NaCl溶液中生长,在1%NaCl时菌株生长状况最优,5%NaCl为该菌株的半抑制浓度。(2)在半抑制浓度(5%NaCl)培养下,菌株培养液中的纤维素酶、中性蛋白酶和β-淀粉酶的酶活力分别为72.4、3.2和0.3 U·mL^(-1)。(3)盐胁迫下,菌株ACP81的纤维素酶和β-淀粉酶酶活随着NaCl浓度增加而增加,而中性蛋白酶则呈相反趋势,且世代时间逐渐变长。分离得到的枯草芽孢杆菌ACP81达到中度嗜盐菌的盐度耐受范围,并且在高渗环境中具有产纤维素酶和β-淀粉酶的优势,可作为高盐有机废水的生化处理的候选菌株。 | 李巧玲 李爱博 黄志远 张小平 卞方圆 钟哲科 | 2023 | 生态学杂志2023，42，8： | 1 |
| 8 | 中国毛虾自溶前后多肽和氨基酸的变化显示文摘目的:为开发毛虾小分子生物活性肽和氨基酸类产品提供依据。方法:测定毛虾内源蛋白酶的pH和温度,分析自溶前后产物中多肽、氨基酸和分子量的变化。结果:内源蛋白酶的最适温度为45℃,最适pH为8.0,该条件下反应4 h后,多肽质量浓度为10.36 mg/mL;总游离氨基酸、必需氨基酸以及疏水性氨基酸含量提升,苦味氨基酸占比增加了(4.54±0.02)%,而鲜味氨基酸和甜味氨基酸占比分别降低了(3.46±0.02)%和(1.78±0.01)%;降解产物分子量<1000 Da的占比由70%提升至87%。结论:自溶技术能降解中国毛虾蛋白并释放小分子肽和氨基酸。 | 祝宝华 李晓晖 杨志艳 惠婷婷 徐晨晨 李燕 | 2023 | 食品与机械2023，39，9： | 0 |
| 9 | 湖光岩风景区耐高温微生物多样性分析及产酶特性研究显示文摘[目的]筛选湖光岩风景区耐高温菌株并且对其进行多样性分析以及产酶特性的研究。[方法]通过50℃高温分离与筛选,分离出耐高温微生物菌株,对分离得到的菌株划线纯化,并且进行16S rRNA鉴定,通过水解圈法进一步探究它们表现出来的蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶的产酶能力。[结果]分离得到10株菌株,经过16S rRNA分析发现,有7株菌株属于芽孢杆菌(Bacillus),占耐高温菌株的70%,属于优势菌株,2株菌株属于短芽孢杆菌(Brevibacillus),1株菌株属于解脲芽孢杆菌(Ureibacillus)。对筛选出的耐高温菌株进行产蛋白酶、产纤维素酶及产淀粉酶的产酶能力研究,发现共5株表现出有产蛋白酶能力,有4株表现出有产淀粉酶能力,有4株表现出有产纤维素酶能力。[结论]湖光岩风景区耐高温菌株为芽孢杆菌,并且部分菌株具有产多种酶的能力。 | 赖崇熙 刘唤明 唐金燕 | 2022 | 安徽农业科学2022，50，18： | 0 |
| 10 | 血液蛋白分解菌的筛选与蛋白酶活性的测定显示文摘本实验旨在从明胶厂的污泥和废水中筛选高效降解血液蛋白的菌株,为探索血液蛋白降解并生产含氨基酸水溶肥提供实验材料。本研究选用兰州阿敏生物明胶有限公司明胶生产后产生的污泥和废水为分离基质,梯度稀释后进行扩菌培养,涂布接种于血琼脂平板上,静置培养12h后,选取产生水解圈最大的菌落进行平板划线纯化。本实验筛选得到了一株目标菌株,经过形态学鉴定、生理生化和分子生物学鉴定后,该菌株为变形杆菌奇异变形杆菌Proteus sp.,编号为NwMCC01910026,蛋白酶活力为100U/mL,为应用于血液的降解及资源化应用提供了参考。 | 王致远 陶志东 李富贵 马海锐 马娜娜 丁功涛 | 2020 | 现代畜牧科技2020，，10： | 0 |
| 11 | 水貂源高产蛋白酶枯草芽孢杆菌的分离筛选及酶学性质显示文摘【背景】开发、筛选优良益生菌菌种是当下畜牧业的研究热点,益生菌的潜在功能也被广为挖掘。【目的】分离、筛选具有良好耐受性且高产胞外蛋白酶的菌株,研究其生物学特性和酶学性质,为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源。【方法】采集健康水貂新鲜粪便,配制酪蛋白培养基初筛和优化Folin-酚法复筛,对筛选菌进行生物学特性研究,获得产蛋白酶能力较强、耐受性较优的菌株,并进行常规鉴定和分子生物学鉴定,最后对蛋白酶酶学性质进行研究。【结果】筛选得到一株高产蛋白酶、耐受性较优的芽孢杆菌,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),编号为3。在初始发酵培养基条件下,酶学性质研究结果表明,该蛋白酶的最适反应温度为70℃,最适反应pH值为9.0,最佳金属离子激活剂为K^(+),Cu^(2+)和Fe^(2+)对酶活力有明显的抑制作用,在20%浓度的有机溶剂作用时蛋白酶未变性失活。【结论】从水貂粪便中分离获得一株具有良好的生物学特性、酶学性质和碱性蛋白酶活性的枯草芽孢杆菌,为该菌株在实际生产应用中提供了基础保障。 | 于德涛 李纪元 刘烁 任建炜 徐航 温建新 | 2023 | 微生物学通报2023，50，9： | 0 |
| 12 | 天祝传统藏曲中蛋白酶产生菌的筛选与酶学特性研究显示文摘采用酪蛋白平板对藏香型白酒大曲中高产蛋白酶菌株进行分离筛选,然后通过硫酸铵沉淀、透析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析对其产生的蛋白酶进行纯化,并研究其酶学性质。结果表明:菌株ZP-8产酶活力最高,为197.6 U/mL,经鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。纯化后测得酶的分子量约为45.43 kDa,最适pH值为8.0,在pH 7.0~11.0的范围内稳定性好,属于碱性蛋白酶。该酶最适反应温度为50℃,在30~50℃范围内稳定性较好;Mg^(2^(+))、Na^(+)、Ca^(2^(+))和Fe^(2^(+))对蛋白酶相对酶活力无显著影响(P>0.05),Cu^(2^(+))和Mn^(2^(+))具有显著的激活作用(P<0.05)。本研究对酒曲中产蛋白酶微生物的开发利用具有重要的参考价值。 | 张红 张卫兵 乔海军 朱建宁 温得林 张智良 赵丽红 | 2022 | 食品与发酵科技2022，58，4： | 0 |
| 13 | 产蛋白酶菌株的筛选鉴定及产酶优化显示文摘为筛选出高产蛋白酶的菌株,通过干酪素培养基筛选到一株高产蛋白酶的菌株BJ-4,经鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。对菌株的产酶条件进行单因素及响应面优化,确定最佳产酶条件为:葡萄糖0.5%、牛肉膏1.5%、培养温度37.61℃、培养初始pH值6.84、接种量1.36%,优化后酶活力同比增长了71.01%。菌株BJ-4在工业中具有一定的应用前景。 | 张程 谭琴 陈露露 冉松 任新萍 曾晓希 | 2023 | 包装学报2023，15，1： | 0 |
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