| 1 | 胡萝卜软腐欧文氏菌CSSY002菌株hrpN基因的克隆、鉴定及其表达产物Harpin蛋白的活性分析显示文摘从感染软腐病的胡萝b组织中分离出胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝b亚种( Erwinia carotovora subsp, carotovora)CSSY002菌株.用该菌株接种非寄主植物烟草不能引起过敏反应.构建CSSY002菌株的基因组文库,应用α-P^32标记的hrpN基因作探针,通过菌落原位杂交技术从该文库中筛选到1.5~2.0 kb的hrpN-like阳性克隆,进一步将该片段亚克隆到pBluescript—II SK(+)载体中,进行核苷酸序列测定.结果表明,hrpN-like基因(即hrpNCSSY002基因)的开放阅读框(ORF)为1071bp,其核苷酸序列已在Genbank注册,登录号为bankit AY999002.hrpN-like基因的编码产物Harpin—like蛋白(即HarpinCSSY002蛋白)由356个氨基酸残基组成,分子量为36.64×10^3,等电点pI5.9.将hrpN—like基因构建到表达质粒pET-28a(+)的17强启动子下,并转化到大肠杆菌工程菌JM109(DE3)细胞中,经WTG(异丙基硫代-β-D半乳糖苷)诱导获得Harpin-like蛋白的高效表达,并通过接种烟草叶片的过敏反应检测Harpin—like蛋白的生物学活性. | 曹茂林 张珏 汤承 CUI Yaya 吴伯骥 | 2007 | 应用与环境生物学报2007，13，2： | 4 |
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