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| 1 | Dynamic changes of typeⅠ,Ⅲand N collagen synthesis and distribution of collagen-producing cells in carbon tetrachloride-induced rat liver fibrosis显示文摘AIM To find out the relationship between the gene transcription of different types ofprocollagen and the deposition of the relevant collagens in the liver tissue and to confirm the types of collagen producing cells in liverfibrogenesis.METHODS Dynamic changes of the expression of α1(Ⅰ ), α1 (Ⅲ ) and α1 (Ⅳ) procollagen mRNAand relevant collagens and the distribution ofcollagen producing cells during liver fibrogenesis of rat induced by CCl4 (20 weeks)were investigated with Northern blot analysis,in situ hybridization and immunohistochemicaltechniques.RESULTS The increased expression of α1 (Ⅲ)procollagen mRNA by Northern blot analysis was the most predominant one among the threemRNAs during fibrogenesis. However, theenhanced expression of al (Ⅳ) procollagenmRNA occurred very early while the expressionof α1 (Ⅰ) mRNA was not enhanced much until themiddle stage of the exPeriment. D6smin (Dm)positive hepatic stellate cells (HSCs) and fewmyofibroblasts (MFs) in and around the necrotic areas expressed α1 (Ⅰ), α1 (Ⅲ) and α1 (Ⅳ)procollagen mRNA signals detected by in situhybridization at the early stage of theexperiment. All the three procollagen mRNAsignals thereafter mainly localized in fibroblasts (Fbs) and MFs in fibrotic septa during the middle and late stages of fibrosis, which distributedparallel to the corresponding collagens detected by immunohistochemical study. ln addition, the endothelial cells of sinusoids and the small blood vessels within the septa also showed α1(Ⅳ) procollagen mRNA and type Ⅳ collagen expressionCONCLUSION It is considered that 'HSC-MF-Fb' effect cell system is the major cellularsource of collagen production in liver fibrosis, in which HSCs are collagen producing precursor cells in the early liver fibrogenesis, thereafter the synthesis of type Ⅰ, Ⅲ and Ⅳ collagens (Col Ⅰ, Col Ⅲ and Col Ⅳ) mainly derives fromMFs and Fbs, which play a very important role in the progress of liver fibrosis. The endothelialcells along sinusoids, as another source of Col Ⅳ production, might participate in the capillization of liver sinusoids. | DU Wei-Dong ZHANG Yue-E ZHAl Wei-Rong and ZHOU Xiao-Mei(Department of Pathology, Shanghai Medical University, Shanghai200032, China)(National Laboratory for Oncogenes and Related Genes, ShanghaiCencer Institute)See invited commentary on page 388 | 1999 | World Journal of Gastroenterology1999，5，5： | 47 |
| 2 | 根癌农杆菌介导苜蓿遗传转化体系的建立显示文摘以建立的苜蓿高频再生体系为基础,利用GUS染色组织分析法,研究了影响根癌农杆菌(AgrobacteriumtumefaciensConn)LBA4404菌株介导的苜蓿(MedicagosativaL.)遗传转化的若干因素,建立了苜蓿快速有效的遗传转化体系,获得了转BADH基因植株。苜蓿的不同基因型、附加乙酰丁香酮的浓度、预培养与否、菌液浓度、共培养时间和卡那霉素浓度等对转化频率都有一定影响。最高转化频率可达43.3%,抗性植株经PCR和PCR-Southernblot检测表明,目的基因已整合进苜蓿基因组中。 | 梁慧敏 夏阳 孙仲序 王太明 刘德玺 王国良 黄剑 陈受宜 | 2005 | 农业生物技术学报2005，13，2： | 38 |
| 3 | 活血祛瘀法干预激素性股骨头坏死骨组织的修复显示文摘背景:激素性股骨头坏死的发病机制尚不明确,该病所伴随的塌陷破坏和重建性修复或与'骨形成-吸收'偶联失效所引起微观骨结构改变有关。活血祛瘀法经临床证实对该病有积极作用。但目前针对活血祛瘀法促进骨坏死修复的作用机制尚不清楚,相关国内外文献报道较少。目的:制备激素性股骨头坏死兔模型,探究活血祛瘀法对激素性股骨头坏死修复的干预作用。方法:50只新西兰兔随机分为3组:正常组10只、模型组和中药组(桃红四物汤组)各20只,采用内毒素联合甲强龙的方法制备激素性股骨头坏死模型,最后一次肌肉注射甲强龙后24 h,中药组给予0.3 g/kg桃红四物汤混悬液灌胃,正常组和模型组灌服等体积超纯水,连续8周。实验第8周分别进行高分辨率MRI检查和病理学组织检测以评估建模效果,采用Western Blot检测兔股骨头ABCB1、RUNX2、OPN、RANK、RANKL、PPAR、骨保护素、血管内皮生长因子的蛋白表达水平。结果和结论:(1)经苏木精-伊红染色显示:模型组可见部分骨小梁断裂,骨细胞核固缩,骨小梁空骨陷窝,骨髓细胞坏死,与正常组相比空骨陷窝率差异有显著性意义(P<0.05),中药组可见成骨活动仍较为活跃,骨小梁形态较好,说明活血祛瘀法可改善坏死区域组织修复。(2)高分辨率MRI显示:模型组股骨头外形基本正常,股骨头内可见低信号带;中药组股骨头外形趋于正常,股骨头内近骨骺处有小块低密度区,大部分骨组织灰度值正常,提示活血祛瘀法可改善坏死区域影像学改变。(3)Western Blot检测结果:模型组与正常组相比RUNX2、RANK、RANKL的蛋白表达升高,ABCB1、骨保护素、血管内皮生长因子蛋白表达下降;中药组与模型组相比,除RANK、RANKL表达下降外,其余均升高,差异有显著性意义(P<0.05)。(4)结果说明:活血祛瘀法促进兔激素性股骨头坏死的修复可能与调节ABCB1、RUNX2、RANK、RANKL、骨保护素、血管内皮生长因子蛋白的表达水平有关。 | 陈雷雷 陈晓波 洪郭驹 陈达 杨鹏 何伟 | 2016 | 中国组织工程研究2016，20，15： | 35 |
| 4 | 半夏凝集素基因(pta)导入水稻及其表达的初步研究显示文摘半夏凝集素基因是一种有重要价值的抗虫基因。利用RACE PCR技术克隆出半夏凝集素 (pta)基因 ,并将它构建到载体pCAMBIA1 30 5中形成双元载体 (含pta基因和hpt基因 )。利用农杆菌介导法将pta基因转入粳稻品种鄂宜 1 0 5、中花 1 2和籼稻品种E优 5 32成熟胚诱导的愈伤组织中。通过PCR检测 ,从 1 1 7株T0 代再生植株中筛选出 36株 (其中鄂宜 1 0 5、中花 1 2、E优 5 32分别为 1 9株、7株、1 0株 )转基因植株。对这些转基因后代植株进行Southernblot分析和RT PCR分析表明 :pta基因已经整合到受体细胞基因组中 ,并在转录水平上得到了有效表达。通过对转基因后代的遗传分析 ,成功地从T1 代表现为 1∶2∶1孟德尔分离的分离群体中筛选出 7个独立转基因水稻纯系 (其中包括 4个鄂宜 1 0 5、1个中花 1 2和 2个E优 5 32转基因纯系 )。对这 7个独立转基因水稻T2 代纯系进行褐飞虱生物抗性鉴定和田间隔离喂养实验 ,结果显示 ,这些转基因纯系对褐飞虱的存活率和发育进度均有显著的抑制作用。同时 ,实验结果还表明 2~ 5mg L的 2 ,4 D是愈伤组织诱导和生长的必需条件 ,而且受体的基因型对愈伤组织诱导率和转化频率均有显著影响 ,在同等条件下 。 | 张红宇 吴先军 唐克轩 汪旭东 孙小芬 周开达 | 2003 | Acta Genetica Sinica2003，30，11： | 37 |
| 5 | Activating mechanism of transcriptor NF-kappaB regulated by hepatitis B virus X protein in hepatocellular carcinoma显示文摘AIM:To investigate the mechanism and significance of NF-κB activation regulated by hepatitis B virus X protein (HBx) in hepatitis B virus (HBV)-associated hepatocellular carcinoma (HCC).METHODS:The expression levels of HBx, p65,IκB-α and ubiquitin were detected by immunohistochemistry in HCC tissue microarrays (TMA) respectively, and IκB-α was detected by Western blot in HCC and corresponding liver tissues.RESULTS: The percentage of informative TMA samples was 98.8% in 186 cases with a total of 367 samples. Compared with corresponding liver tissues (60.0%),the HBx expression was obviously decreased in HBV-associated HCC (47.9%,u=2.24,P<0.05).On the contrary, the expressions of p65 (20.6% vs45.3%, u=4.85, P<0.01) and ubiquitin (8.9% vs 59.0%,u=9.68,P<0.01) were notably elevated in HCC.In addition, IκB-α had a tendency to go up. Importantly, positive relativity was observed between HBx and p65 (X^2=10.26,P<0.01), p65 and IκB-α (x^2=16.86,P<0.01), IκB-α and ubiquitin (x^2=8.90, P<0.01) in HCC, respectively.CONCLUSION:Both active and non-active forms of NF-κB are increased in HBV-associated HCC. Variant HBx is the major cause of the enhancement of NF-κB activity. The activation always proceeds in nucleus and the proteasome complexes play an important role in the activation. | TaoWang YiWang Meng-ChaoWu Xin-YuanGuan Zheng-FengYin | 2004 | World Journal of Gastroenterology2004，10，3： | 36 |
| 6 | Apoptosis induced by norcantharidin in human tumor cells显示文摘INTRODUCTIONThe antitumor activity of norcantharidin (NCTD),the demethylated analogue of cantharidin,wasstudied in the early 1980s in China.NCTD has noside effects on urinary organs which cantharidin hasshown and is easier to synthesize,and it can inhibitthe proliferation of several tumor cell lines as wellas transplanted tumors.Clinical trials with NCTD asa monotherapeutic agent indicated that NCTD hadbeneficial effects in patients with different kinds | Zhen Xiao Sun Qing Wen Ma Tian De Zhao Yu Lin Wei Guang Sheng Wang Jia Shi Li | 2000 | World Journal of Gastroenterology2000，6，2： | 31 |
| 7 | 黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺损伤的作用机制研究显示文摘目的研究黄芩苷对甲型流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性损伤的作用机制。方法将96只ICR鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组(100 mg.kg-1),黄芩苷组(1 500、750、375 mg.kg-1)[5],每组16只。用流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,制备小鼠流感病毒性肺炎模型,用不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察肺组织H-E染色切片病理变化,采用RT-PCR测定肺组织c-jun、c-fos mRNA表达,采用Western blot测定肺组织c-jun、磷酸化c-jun蛋白表达,应用ELISA检测肺匀浆炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的含量。结果黄芩苷750、375 mg.kg-1剂量均能明显减轻肺组织炎性损伤;明显降低c-jun、c-fosmRNA的表达(P<0.05,P<0.01),明显降低c-jun、磷酸化c-jun蛋白表达(P<0.01);明显抑制TNF-α、IL-1β的分泌(P<0.01)。结论黄芩苷能够缓解甲型流感病毒诱导的炎性病理损伤,其可能通过抑制流感病毒感染引起的转录因子AP-1高表达而降低炎性细胞因子的分泌水平,从而发挥抗流感病毒感染的作用。 | 万巧凤 顾立刚 殷胜骏 吴珺 邱泽计 | 2012 | 中国药理学通报2012，28，2： | 33 |
| 8 | 艾灸循经筋阿是穴对膝骨关节炎RANKL和OPG调控机制研究显示文摘目的:观察艾灸循经筋对膝骨性关节炎的镇痛疗效以及对破骨细胞分化因子(RANKL)及破骨细胞分化抑制因子(OPG)调控机制的表达影响。方法:采用随机原则将膝骨关节炎患者分为经穴组、阿是穴组以及循经筋规律性阿是穴组,共90例患者,连续治疗4周。分别于治疗前后采用疼痛VAS评分比较,抽取膝关节滑液分离细胞,检测RANKL及OPG表达变化,观察比较各疗法的镇痛疗效和对RANKL及OPG调控机制。结果:三组均有明显的镇痛效果,经穴组与阿是穴组治疗后RANKL及OPG显著降低,循经筋阿是穴组具有更强的抑制RANKL及OPG表达的作用,统计学有显著性差异。结论:艾灸对膝骨关节炎止痛效果良好,在抑制RANKL及OPG介导的炎症反应方面,经穴灸法与阿是穴灸法具有明显的抑制作用,且循经筋阿是穴灸法疗效更佳。 | 董宝强 张书剑 李春日 韩煜 陈以国 | 2013 | 辽宁中医药大学学报2013，15，10： | 31 |
| 9 | 猪α干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达显示文摘将猪α干扰素(PoIFN-α)基因克隆入毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA中,电转化毕赤酵母KM71H菌株,抗生素ZeocinTM浓度梯度筛选高抗性转化子,以PCR鉴定阳性重组菌株。筛选出的高拷贝重组菌株分别通过BMGY/BMMY培养基和YPG培养基,用甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot印迹杂交结果证实,表达产物为重组PoIFN-α融合蛋白,经细胞毒性试验检测(WISH/VSV系统),表达产物的抗病毒活性为4.1×104IU/mL。 | 葛丽 李震 于瑞嵩 刘惠莉 张德福 周智爱 尹逊和 | 2005 | 中国兽医学报2005，25，3： | 28 |
| 10 | 榄香烯对大鼠胶质瘤C6细胞Bcl-2家族基因及蛋白表达的影响显示文摘目的探讨莪术提取物-榄香烯诱导大鼠胶质瘤C6细胞系凋亡机制及其对Bcl2家族基因及蛋白质表达的影响。方法应用RTPCR、Westernblot方法检测榄香烯在0、20、40、60、80μg/ml浓度及作用时间为12、24、36、48、72h时处理的大鼠胶质瘤C6细胞系,利用流式细胞仪观察细胞的凋亡、细胞增殖的变化和Bcl2家族基因及蛋白质表达的变化。结果经榄香烯20、40、60、80μg/ml处理大鼠胶质瘤C6细胞48h后,单视野细胞计数分别为(536±9)个、(375±10)个、(246±9)个、(112±10)个,与浓度为0μg/ml时单视野细胞计数(625±12)个相比体外增殖抑制效应比差异有统计学意义(F=1292.416,P<0.05)。经不同浓度榄香烯处理后C6细胞凋亡率分别增加到(27±2)%、(29±4)%、(32±3)%、(35±5)%,同时有亚二倍体凋亡峰,即Ap峰出现。榄香烯可明显下调Bcl2/Bclx/l基因及蛋白质表达,且该作用呈浓度、时间依赖性,而对Bax基因及蛋白质无明显影响。结论下调Bcl2/Bclx/l基因及蛋白质表达可能是榄香烯诱导凋亡、抑制C6细胞增殖的主要机制。 | 徐英辉 董斌 罗其中 周洪语 贾宜昌 杨友峰 王以政 | 2005 | 中华医学杂志2005，85，24： | 24 |
| 11 | 凋亡相关基因Livin、Smac/DIABLO在胃癌组织中的表达及其意义显示文摘背景与目的:作为一种促凋亡基因,Smac/DIABLO与凋亡抑制基因Livin相互作用,共同参与调控细胞癌变的起始及发展。本研究检测凋亡抑制蛋白Livin及线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO在胃癌组织中的表达,观察其表达水平与胃癌各临床病理因素的关系。方法:应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法检测75例手术切除的胃癌组织、20例癌旁组织及正常胃组织中Livin mRNA和Smac/DIABLO mRNA的表达,Western blot结合及免疫组化SP法检测两种蛋白的表达及组织学定位。结果:正常胃组织及癌旁组织中均无Livin mRNA表达,胃癌组织中Livin mRNA表达显著上调,相对表达量为6.374±4.759,低分化胃腺癌组织及有淋巴结转移组的相对表达量显著高于中高分化胃腺癌组织(P<0.05),其表达与肿瘤大小、浸润深度及TNM分期无关,Livin蛋白的表达结果与之相符;胃癌组织中Smac/DIABLO mRNA的表达(0.731±0.420)低于正常胃组织(1.104±0.276)及癌旁组织(1.061±0.737),但差异无统计学意义(P>0.05),Smac/DIABLO mRNA表达水平与胃癌各临床病理因素无关;Smac/DIABLO蛋白表达与mRNA表达存在差异。Smac/DIABLO在肠型胃癌(84.38%)与弥漫型胃癌(60.65%)中的表达有一定差异(P<0.05)。结论:Livin与Smac/DIABLO在不同阶段和不同病理类型胃癌中的表达及相关性存在差异,Livin基因高表达与胃癌的发生及分化转移密切相关。 | 赵毅 邓鑫 王强 | 2009 | 癌症2009，28，6： | 24 |
| 12 | 采用PCR方法检测Fmr1基因敲除小鼠的基因型显示文摘目的为Fmr1基因敲除小鼠探索快速、简单的基因型PCR检测方法。方法设计两对引物扩增野生型Fmr1基因和Fmr1缺陷突变基因的DNA片段,用PCR仪梯度方案测试最佳退火温度,并将所得基因型结果与经典的western blot方法比较。结果野生型仅在800bp处有一条条带,突变纯合子仅在500bp处有一条条带,杂合子则在500bp和800bp处出现两条条带。用PCR方法获得的Fmr1基因分析结果与经典的western blot方法获得的结果完全一致。结论用PCR方法分析Fmr1基因敲除鼠的基因型具有快速、简单、廉价和适用的特点。 | 邢州 孙卫文 黄越玲 易咏红 戴丽军 陈盛强 李敏雄 | 2009 | 现代医院2009，9，5： | 22 |
| 13 | LRP16基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义显示文摘背景与目的:既往研究表明雌激素通过其受体!直接上调LRP16的表达,LRP16基因的高表达促进乳腺癌细胞的增殖。本研究旨在探讨LRP16基因在乳腺癌组织中的表达状况及其与临床病理特征的关系。方法:收集52例乳腺癌组织及其配对癌旁组织,Northernblot与半定量RT-PCR法分别检测22例和30例标本中LRP16mRNA水平。免疫组化法检测肿瘤组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及Ki-67的表达情况。结果:Northernblot检测结果表明,22例癌组织LRP16mRNA的表达较癌旁组织高2倍的有9例,高表达率为40.9%(9/22)。高表达LRP16的9例中有7例ER阳性,8例PR阳性;而非高表达13例中ER阳性6例,PR阳性5例,两组ER与PR阳性率均有显著性差异(P<0.05)。LRP16高表达的9例中只有1例PR和ER同时阴性,而非高表达的13例中有7例。22例患者中,13例肿瘤直径3.0~4.5cm,其中LRP16基因高表达组占8例;有腋窝淋巴结转移的12例中8例LRP16高表达。8例高表达Ki-67患者中6例LRP16高表达。半定量RT-PCR检测结果表明,30例肿瘤标本中9例(30.0%)LRP16mRNA的表达水平明显高于癌旁组织,9例LRP16高表达者ER、PR均阳性,Ki-67高表达,且瘤体直径均大于3.5cm,均有腋窝淋巴结转移,与非高表达组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:LRP16基因表达水平与ER/PR阳性率、细胞增殖活性、肿瘤直径、远处淋巴结转移密切相关,提示LRP16基因可能参与促进乳腺癌的增殖与转移。 | 廖代祥 韩为东 赵亚力 蒲永东 母义明 罗成华 李向红 | 2006 | 癌症2006，25，7： | 21 |
| 14 | 解偶联蛋白-2在大鼠非酒精性脂肪肝中的表达显示文摘目的:探讨解偶联蛋白-2(uncoupling protein 2,UCP2) 在大鼠非酒精性脂肪肝发生中的作用.方法:Wistar大鼠64只,随机分为高脂饮食诱导脂肪肝组和正常对照组,分别于2,4,8,12 wk用免疫组织化学和Western blot技术检测肝组织中UCP2表达变化,生化检测大鼠血清甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FAA)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量.结果:大鼠非酒精性脂肪形成过程中UCP2阳性细胞数和表达强度逐渐增加,所有动物肝组织均出现不同程度的肝细胞脂肪变性,并逐渐加重.2,4,8,12 wk血清TG(0.78±0.05,0.85±0.10,1.16±0.10,1.39±0.07 mmol/L)、FAA(371.3±13.7,439.2±14.1,486.3±13.6, 636.7±20.3 μmol/L)和ALT(630.1±41.7,713.5±75.0, 925.2±105.0,1 090.2±65.0 nkat/L)含量较对照组增高,其中TG、FAA 4,8,12 wk均有显著性(P<0.05或 P<0.01),ALT 8,12 wk有显著性(P<0.01).结论:随着非酒精性脂肪的形成和程度加重,UCP2表达逐渐增强,其介导的酶活性显著增高,启动脂质过氧化反应,促进脂肪肝的形成和发展. | 顾小红 张云东 冯爱娟 | 2005 | 世界华人消化杂志2005，13，19： | 20 |
| 15 | 银杏苯丙氨酸解氨酶基因的克隆和序列分析显示文摘根据其他植物PAL基因的DNA序列的保守区域,设计了一对简并引物,经PCR扩增,得到一条862 bp的特异性扩增带。将PCR扩增产物构建到T-载体并测序,获得了862 bp DNA序列。通过分析所得的862 bp DNA序列及其编码的氨基酸序列,与其他植物PAL基因的DNA序列和蛋白质序列分别进行比较,证实了所得序列为银杏PAL基因的部分序列。Gbpal1已经被Genebank收录,序列号为AY578145。Southern杂交结果表明银杏PAL是一个多基因家族。 | 程水源 杜何为 许锋 陈昆松 | 2005 | 林业科学研究2005，18，5： | 19 |
| 16 | Kozak序列+4G提高绿色荧光蛋白在HEK293细胞中的表达显示文摘构建含不同Kozak序列的绿色荧光蛋白(GFP)基因真核表达载体,并检测它们在HEK293细胞中的表达差异。通过设计突变的PCR引物改变目的基因GFP的Kozak序列,+4位碱基分别为A和G,且不改变氨基酸编码,将PCR扩增的GFP片段与载体pcDNA3.1进行酶切、连接、转化、鉴定。成功构建的pHGFP-A,pHGFP-G质粒采用脂质体法转染HEK293细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光表达,流式细胞术检测目的蛋白GFP的荧光表达阳性率,Western blot检测目的蛋白GFP的表达。构建的两质粒均能有效转染HEK293细胞,其中流式细胞术分析显示:pHGFP-A组GFP阳性率约为15%,pHGFP-G组GFP阳性率约为45%;Western blot显示pHGFP-G的GFP表达量约为pHGFP-A的GFP表达量3.87倍。结果表明,Kozak序列+4G(-3位为嘌呤碱基时)在蛋白表达中发挥重要作用,可以使绿色荧光蛋白GFP在HEK293细胞中的表达量提高约4倍。 | 杜明梅 叶玲 刘建伟 刘静 杨立娜 | 2008 | 生物工程学报2008，24，3： | 19 |
| 17 | 清肠化湿方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠TLR-4、NF-κBp65蛋白表达的影响显示文摘目的观察三硝基苯磺酸(TNBS)法溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜TLR-4、NF-κBp65的变化特点及清肠化湿方对TLR-4、NF-κBp65蛋白表达的影响。方法采用TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型。将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、清肠化湿方组、巴柳氮组,治疗10d后处死大鼠取新鲜结肠标本,观察黏膜大体形态及组织学改变,并采用Westernblot法检测TLR-4、NF-κBp65蛋白表达水平。结果模型对照组TLR-4、NF-κBp65蛋白表达均高于正常对照组,清肠化湿方组TLR-4、NF-κBp65的表达低于模型对照组,同时清肠化湿方组大鼠结肠形态及组织学损伤评分均有降低。结论清肠化湿方对溃疡性结肠炎模型大鼠具有治疗作用,抑制TLR-4、NF-κBp65的表达可能是其作用机制之一。 | 顾培青 沈洪 刘丽 朱磊 叶柏 朱萱萱 | 2010 | 中国中医急症2010，19，1： | 18 |
| 18 | 环磷酰胺在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制的研究显示文摘目的探讨环磷酰胺(CTX)在动物模型体内抗肿瘤影响及抑瘤机制。方法建立小鼠实体瘤模型和腹水瘤模型:分别在昆明系小鼠皮下接种S180肉瘤细胞、腹腔接种鼠源性H22肝癌细胞,同时给予环磷酰胺处理小鼠,其后观察各组肿瘤生长大小,小鼠存活率的变化;应用Western blot技术检测凋亡抑制基因(Bcl-2)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)含量、抑癌基因P53及P21的蛋白表达。结果环磷酰胺组肿瘤重量明显低于模型组(P<0.05),其抑瘤率为88.55%;小鼠存活天数均较模型组长,其生命延长率为57.73%;环磷酰胺可明显诱导P53的表达,抑制BCL-2的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡,但对P21没有作用;对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平亦有抑制作用。结论环磷酰胺可通过激活抑癌基因P53,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促血管生成因子VEGF等多种途径,发挥抗肿瘤活性,为抗肿瘤动物模型尤其为调节抗肿瘤相关基因表达方面的阳性药物对照提供重要的实验依据。 | 迟淑萍 白冰珂 谢进 陈红鸽 杜丽 由莉越 程云 | 2012 | 中国医药导报2012，9，14： | 17 |
| 19 | β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位显示文摘旨在研究β-catenin在不同毛色羊驼皮肤中的表达和定位,探索其与毛色的关系。以成年白色和棕色羊驼为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术、Western blot和免疫组织化学技术,对β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤中mRNA、蛋白表达水平和定位进行研究。实时荧光定量PCR结果显示,β-catenin在棕色羊驼皮肤组织中的相对基因表达量是白色羊驼皮肤组织的1.662倍;Western blot结果显示,羊驼皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约85 ku与兔抗β-catenin多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,棕色羊驼平均蛋白表达量显著高于白色羊驼;免疫组织化学结果显示,β-catenin在羊驼皮肤的表皮、毛乳头、毛根鞘和皮脂腺中表达,根据光密度值得出,除皮脂腺之外,在表皮、毛乳头和毛根鞘的表达差异极显著(P<0.01)。结果提示β-catenin在白色和棕色羊驼皮肤组织中定位以及表达的差异,表明β-catenin参与毛色形成。 | 于秀菊 董常生 范阔海 贺俊平 姜俊兵 朱芷葳 董彦君 | 2010 | 畜牧兽医学报2010，41，3： | 17 |
| 20 | 成骨肉瘤细胞SOSP-9607中miRNA的克隆与验证显示文摘背景与目的:microRNA(miRNA)是一类非编码蛋白,并参与转录后调节的单链小分子RNA(约20~25个碱基),对基因表达具有重要调控作用,与肿瘤的发生存在着密切的关系。本研究拟克隆成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中miRNA,并对部分功能性基因进行验证。方法:以SOSP-9607细胞作为实验对象,分离提取细胞内小片段RNA(≤200nt),多聚腺苷酸化和5′连接子连接后,通过RT-PCR进行反转录和扩增,克隆到pCR4-TOPO载体上得到大约109bpDNA片段,测序后经过生物信息学分析确定miRNA的表达情况。根据当前miRNA的研究现状,在克隆到的miRNA中选取部分功能性miRNA和新发现miRNA,合成相应探针后与从SOSP-9607细胞、HeLa细胞和成骨肉瘤组织中分离出的小片段RNA进行Northern印迹验证。结果:克隆测序后得到182个克隆体,经生物信息学分析发现有47个miRNA(25种),其中含有23种已知的miRNA和2种Nature杂志上预测的miRNA(miR-165和miR-166)。选取的三条实体瘤相关的miRNA(miR-21、miR-20a、miR-17-5p)以及两条预测的miRNA进行Northern印迹验证,miR-21、miR-20a、miR-17-5p在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中均表达,预测的miR-165和miR-166在SOSP-9607细胞和成骨肉瘤组织中亦均表达,但miR-166在HeLa细胞中没有表达。结论:克隆了SOSP-9607细胞中的miRNA,并验证了部分功能性miRNA的表达,提示miRNA与肿瘤发生可能有密切的关系。 | 高杰 杨彤涛 裘秀春 鱼兵 韩建伟 范清宇 马保安 | 2007 | 癌症2007，26，6： | 16 |
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